Tóm tắt

Mục tiêu: phân lập và nuôi cấy tế bào gốc trung mô từ mô dây rốn. Đối tượng và phương pháp: mẫu dây rốn (n = 5) thu nhận tại Khoa Sản, Bệnh viện Đa khoa Vạn Hạnh, được xử lý cắt thành những mảnh mô nhỏ kích thước khoảng 2 mm2 và nuôi cấy trong môi trường chuyên biệt để phân lập tế bào. Tế bào sau khi phân lập nuôi cấy tăng sinh được kiểm tra tính gốc thông qua các chỉ tiêu như khả năng bám dính trên bề mặt dụng cụ nuôi cấy, biểu hiện các dấu ấn bề mặt cho dòng tế bào gốc trung mô trong giai đoạn nuôi cấy. Đánh giá tính an toàn của quá trình phân lập qua kết quả kiểm tra nhiễm sắc thể đồ, nội độc tố và mycoplasma. Kết quả: phân lập và nuôi cấy được tế bào gốc trung mô từ mô dây rốn, tế bào thu nhận được có khả năng bám dính vào bề mặt bình nuôi cấy, tế bào có dạng thuôn dài, giống với nguyên bào sợi, biểu hiện dương tính với các dấu ấn CD44, CD73, CD90 (> 95%) và âm tính với các dấu ấn CD14, CD45, HLADR (< 5%). Kết quả đánh giá tính an toàn của mẫu tế bào MSC phân lập được, kết quả âm tính với nội độc tố và mycoplasma. Kết luận: đã phân lập và nuôi cấy được tế bào gốc trung mô từ mô dây rốn, tế bào đạt các tiêu chí của tế bào gốc trung mô từ mô dây rốn và đảm bảo tính an toàn để ứng dụng trong điều trị lâm sàng. * Từ khóa: Tế bào gốc trung mô; Mô dây rốn; Phân lập tế bào gốc trung mô.

Abstract

Objectives: To isolate and culture umbilical cord tissue mesenchymal stem cells. Subjects and method: Using human umbilical cords (n = 5) for isolated mesenchymal stem cells were collected from the Obstetrics Department, Vanhanh General Hospital. After harvested, cords were segmented into small pieces about 2 mm2 in size, cultured in a specialized medium for isolation of mesenchymal stem cells. These stem cells were tested stemness based on criteria such as their ability to stick on the surface of culture flasks, expression of surface markers of mesenchymal stem cell lines during the culturing period. Safety evaluation was investigated by examining karyotype, and the presence of endotoxin, mycoplasma. Results: Umbilical cord - mesenchymal stem cells samples were successfully solated and cultured. The obtained cells have ability to attach to the surface of culture flasks and having fibroblast-like shape. These cells were positive with markers: CD44, CD73, CD90 (> 95%) and negative with marker CD14, CD45, HLADR and passed the safety test with endotoxicity and mycoplasma. Conclusions: We were successful in isolation, expansion of umbilical cord - mesenchymal stem cells. The cell population met the criteria of UC-MSC and ensure safety for use in treatment. * Keywords: Mesenchymal stem cell; Umbilical cord tissue; Isolation of mesenchymal stem cells.